GB/5009.205-2024-食品安全国家标准食品中二惡英及其类似物毒性当量的测定

前 言

  GB 5009.205-2024的实施是中国食品安全监管的重要一步，它加强了对食品中有毒有害物质含量的控制，保障了公众的健康权益。对于食品生产企业和检测机构来说，

熟悉并严格执行该标准是保证食品安全的关键。与前一版“GB 5009.205-2013”相比较，在二噁英测定 “黄金标准”-气相色谱-磁式高分辨质谱法（GC-HRMS）的基础上，

新增气相色谱-三重四极杆质谱法（GC-MS/MS），为国内首个使用GC-MS/MS仪器测定食品中二噁英含量的国家标准。

本标准规定了食品中17种2,3,7,8-取代的多氯代二苯并二噁英、多氯代二苯并呋喃(PCDD/Fs)

和12种二噁英样多氯联苯(DL-PCBs)含量及其毒性当量(TEQ)(见附录 A 的表 A.1)的测定方法。

第一法“同位素稀释-气相色谱-磁式高分辨质谱法”适用于食品中 17 种 PCDD/Fs和 12 种 DL

PCBs含量及其 TEQ 的测定。

第二法“同位素稀释-气相色谱-三重四极杆质谱法”适用于肉及肉制品、水产动物及其制品、乳及乳制品、蛋及蛋制品和油脂中17种 PCDD/Fs和12种 DL-PCBs含量及其 TEQ 的测定。

有研究指出，普通人群暴露的二噁英90％以上来源于动物源性食物摄入。由于二噁英含量极低，且容易受其他结构类似物质干扰，因此二噁英的检测分析一直是业界的难点之一。

下面让我们一起来看看该标准的对应方案及仪器配置吧！

第一法 同位素稀释-气相色谱-磁式高分辨质谱法

2原理 

试样经提取、净化和浓缩后,采用气相色谱-磁式高分辨质谱仪测定,稳定性同位素稀释法定量;以各目标化合物的毒性当量因子(TEF)与所测得的含量相乘后累加,计算样品中 PCDD/Fs和 DL-PCBs的 TEQ。

3、试剂和材料

3.1试剂

本方法所用试剂均为分析纯,水为 GB/T6682规定的一级水。

3.1.1 丙酮(C3H6O):农残级。

3.1.2 正己烷(C6H14):农残级。

3.1.3 甲苯(C7H8):农残级。

3.1.4 环己烷(C6H12):农残级。

3.1.5 二氯甲烷(CH2Cl2):农残级。

3.1.6 甲醇(CH3OH):色谱级。

3.1.7 正壬烷(C9H20):≥99%。

3.1.8 乙酸乙酯(CH3COOCH2CH3):农残级。

3.1.9 无水硫酸钠(Na2SO4):优级纯。

3.1.10 浓硫酸(H2SO4):优级纯。

3.1.11 氢氧化钠(NaOH):优级纯。

3.1.12 硝酸银(AgNO3):优级纯。

3.1.13 提取用硅藻土:堆积密度 18.0g/100mL~36.0g/100mL(如 EXtrelutNT,或等效产品)。

3.1.14 凝胶色谱填料:聚苯乙烯凝胶,38μm~75μm(如 Bio-BeadsS-X3,或等效产品)。

3.1.15 硅胶:75μm~250μm。

3.1.16 碱性氧化铝:63μm~200μm(如 EcoChromTM MPAluminaB-SuperI,或等效产品)。

3.1.17 弗罗里土:150μm~250μm。

3.1.18 活性炭:150μm~180μm(如 CarbopackC,Supelco10258,或等效产品)。

3.1.19 净化用硅藻土:26μm(如 Celite545AW,Supelco20199-U,或等效产品)。

4、仪器和设备 

4.1 气相色谱-磁式高分辨质谱仪(GC-HRMS)。

4.2 天平:感量为0.1g和0.001g。

4.3 组织匀浆器。

4.4 粉碎机。

4.5 冷冻干燥机。

4.6 旋转蒸发仪。

4.7 氮气浓缩器。

4.8 超声波清洗器。

4.9 摇床。

4.10 索氏提取器,配备提取套筒。

4.11 加速溶剂提取仪(可选)。

4.12 马弗炉:能够在200 ℃~700 ℃范围内保持恒温(±10 ℃)。

4.13 烘箱:能够在105 ℃~250 ℃范围内保持恒温(±5 ℃)。

4.14 玻璃层析柱:带聚四氟乙烯柱塞,150mm(长)×8mm(内径),300mm(长)×15mm(内径)。

4.15 全自动样品净化系统:配备酸碱复合硅胶柱、碱性氧化铝柱和活性炭净化柱。

4.16 凝胶渗透色谱柱(GPC):玻璃柱(内径 15 mm~20 mm),内装 50gS-X3 凝胶,或等效全自动GPC。

5、气相色谱参考条件 

5.1气相色谱参考条件如下:

a) 色谱柱:5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷柱,60m×0.25mm×0.25μm,或相当者;

b) 进样口温度:280 ℃;

c) 进样模式:不分流进样,恒流模式;

d) 进样体积:2μL;

e) 传输线温度:310 ℃;

f) 柱温:120 ℃(保持 1 min);以 43 ℃/min 升 至 220 ℃ (保 持 15 min);以 2.3 ℃/min 升 至

250 ℃,以0.9 ℃/min升至260 ℃,以20 ℃/min升至310 ℃(保持9min);

g) 载气:高纯氦气(>99.999%),0.8mL/min。

5.2、质谱参考条件 

质谱参考条件如下:

a) 电离模式:电子轰击源(EI);

b) 电子能量:45eV;

c) 参考气:全氟三丁胺(FC-43)或全氟化煤油(PFK);

d) 分辨率:≥10000,参考离子:313.9833(FC-43)或342.9787(PFK);

e) 离子源温度:270 ℃; f) 离子监测模式:多离子监测(MID);

g) 监测离子:各化合物监测离子的精确质量数见表 C.1。

5.3、DL-PCBs分析条件

气相色谱条件

气相色谱条件如下:

a) 色谱柱:5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷柱,60m×0.25mm×0.25μm,或相当者;

b) 进样口温度:290 ℃;

c) 进样模式:不分流进样,恒流模式；

d) 进样体积:1μL;

e) 传输线温度:290 ℃;

f) 柱 温:80 ℃ (保 持 2 min),以 15 ℃/min 升 至 150 ℃,再 以 2.5 ℃/min 升 至 270 ℃ (保 持 3min),以15 ℃/min升至330 ℃(保持1min);

g) 载气:高纯氦气(>99.999%),1.2mL/min。

质谱条件：（同上5.2） 

第二法 同位素稀释-气相色谱-三重四极杆质谱法

1、原理 

试样经提取、净化、分离,采用气相色谱-三重四极杆质谱联用仪测定,稳定性同位素稀释法定量;

以各目标化合物的毒性当量因子(TEF)与所测得的含量相乘后累加,计算样品中 PCDD/Fs和DL-PCBs 的TEQ。

2、试剂和材料

（同上第一法3）

3、仪器和设备

气相色谱-三重四极杆质谱联用仪(GC-MS/MS):带电子轰击电离源(EI)或大气压化学电离源 (APCI)。  

其他仪器和设备：

同4.2~4.16

4、气相色谱参考条件如下:

a) 色谱柱:5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷柱,60m×0.25mm×0.25μm,或相当者;

b) 进样口温度:280 ℃;

c) 进样模式:不分流进样,恒流模式;

d) 进样体积:2μL;

e) 传输线温度:310 ℃;

f) 柱温:120 ℃(保持 1 min);以 43 ℃/min 升 至 220 ℃ (保 持 15 min);以 2.3 ℃/min 升 至

250 ℃,以0.9 ℃/min升至260 ℃,以20 ℃/min升至310 ℃(保持9min);

g) 载气:高纯氦气(>99.999%),0.8mL/min。

5、质谱参考条件如下:

a) 分辨率:四极杆的分辨率应优于或等于单位质量分辨率。

b) 电离模式:电子轰击源(EI),能量为 70eV;或大气压化学电离源(APCI),电晕针电流为3

c) 离μ子A源 。温度:电子轰击源(EI)为280 ℃;或大气压化学电离源(APCI)为150 ℃。

d) 数据采集模式:多反应离子监测模式(MRM),对于所有化合物监测两个特定的母离子和每个母离子产生的一个子离子。各化合物离子对具体信息见表 C.4。

f) 柱 温:80 ℃ (保 持 2 min),以 15 ℃/min 升 至 150 ℃,再 以 2.5 ℃/min 升 至 270 ℃(保 持 3min),以15 ℃/min升至330 ℃(保持1min);

g) 载气:高纯氦气(>99.999%),1.2mL/min。

6、DL-PCBs分析条件 

气相色谱参考条件

（同上4）

质谱参考条件

（同上5）

根据本标准俊齐仪器设备（上海）有限公司推出对应的仪器解决方案：

附 录 参 考 图